期刊简介
《中华儿科杂志》为中国科协主管，中华医学会主办的我国儿科医学领域惟一的高级学术期刊，创刊于1950年。现为月刊，80面/期，面向国内外公开 发行。 读者对象：儿科临床、科研与教学人员,儿童保健工作者。陈翠贞、邓金鎏、诸福棠、周华康、江载芳、吴希如、杨锡强、桂永浩等儿科界著名专家历任总编辑，现任总编辑杜军保教授。本刊办刊宗旨：理论与实践相结合，重在实践；基础与临床相结合，重在临床；普及与提高相结合，重在提高。为促进我国儿科医学领域的学术交流服 务；为我国儿科医学事业的发展与提高服务；为培养我国的儿科医学人才服务；为我国儿童的健康服务。办刊方针：专家办刊，编委会办刊。报道重点：儿科医学领 域的新理论、新成果、新方法、新技术及成熟的临床经验。《中华儿科杂志》是中国核心期刊，是中国期刊方阵中的双效期刊，代表儿科医学领域最高学术水平。被14个国内外权威数据库或工具书收录：中国科技论 文与引文数据库（CSTPCD）；万方数据库系统；美国国立医学图书馆医学索引（MEDLINE）；俄罗斯文摘杂志（AJ）；生物学文 摘;（BIOSIS;PREVIEW）；癌症文摘（CANCERLIT）；生物学文摘（Biological Abstracts）等。
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首页>中华儿科杂志
- 杂志名称：中华儿科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0578-1310
- 国内刊号：11-2140/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：新闻出版署“双效期刊”期刊收录：CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 万方收录(中)
抗人CD14新克隆ZCH-7-2F9单链抗体的真核表达和初步鉴定
宁铂涛；汤永民；CAO Jiang；沈红强；钱柏芹
关键词：单链抗体, 中华仓鼠卵巢(CHO)细胞, CD14, 真核, 表达
摘要：目的 在真核细胞中表达Zhejiang Children's Hospital(ZCH)-7-2F9(简称2F9)单链抗体(scFv2F9)以获得高活性的目的 蛋白,为2F9其他类型的基因工程抗体及其免疫毒素的研究奠定基础.方法 根据pSectag2A多克隆位点、(G4S)3及scFv2F9基因序列,设计含有SfiI、EcoRI酶切位点、6xHis以及终止密码TGA的引物,采用高保真的Taq酶,通过重叠延伸拼接法(splicing by overlapextension,SOE)扩增克隆到scFv2F9基因,将扩增到的目的 基因片段克隆到pGEM T-easy载体,测序核实后再克隆到pSectag2A真核分泌型表达载体中.阳性重组质粒pSectag2A/scFv2F9转染中华仓鼠卵巢(CHO)细胞进行目的 蛋白的瞬时表达,将培养上清浓缩后,流式细胞术观察其对亲本单抗的阻滞效果.结果 真核分泌型表达载体pSectag2A/scFv2F9在CHO细胞中获得成功表达,其相对分子质量为31 000.亲本直标单抗2F9-FITC被真核细胞表达的scFv2F9阻滞后其阳性细胞百分数、平均荧光强度和高峰值分别下降了90.02%、63.30%和63.38%.结论 克隆到的2FgVH和2F9VL基因及构建的真核分泌型表达载体pSectag2A/scFv2F9是正确的,scFv2F9在CHO细胞中获得成功的表达,且有较高的识别和结合人CD14抗原的功能.
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